显微镜的对光方法分为单物镜和双物镜。单物镜是一种在光源上连续照射图像或显微镜的成像设备，通过反射和透射来观察物体或获得图像；双物镜集散光线、折射光线和反射光于一体，通过透射光与光源相配时所形成的透镜能够直接观察到待显示物体而不需对焦。在实际应用中，由于双物显微具有许多优势特性，因此很受欢迎。双物灯显微设备是目前最常用的光学显微镜，它可以使图像得到更好的显示。但是由于成像质量有限，往往不能满足实际需要。随着光学显微技术的不断发展，双物镜集散光线、折射灯光和反射光纤照明光源已成为对光显微镜实现成像的重要手段之一。
一、单物镜和双物镜的结构与区别
单物镜是光学显微镜的重要组成部分，在对光线的反射和透射上，都能起到观察物体或获得图像的作用。然而，单物镜容易出现重影现象，所以一般采用双物镜来解决。双物镜分为光学镜片和镜筒两部分。光谱分析中的双物镜比单物镜具有更高的灵敏度，但在成像质量方面仍然不如单物镜。此外，双物镜比单物镜在散射面积、相位分辨率、成像质量和工作范围上都要弱得多。因此，在应用中必须使用与单物镜相同的光源才能获得最佳成像质量。双物镜集散光线、折射光线和反射光于一体；使用时分别对几个不同角度的光源进行发射和接收，然后使每个光源各具一种散光现象即为双物镜光谱分析中所使用的单光源；同时将所有光的分布信息进行统计并将其集合，再对其进行组合形成一个光谱分析系统或一个光谱分析软件来处理这种复杂的光谱图。
二、对光原理
如果显微镜的成像原理是利用光源照射被观察物，那么就会存在许多反射现象。因为物体表面的物质由于受反射光照射而发生了形变和折射效应就会形成焦点。这些焦点就是通过透射光与光源相配形成的透镜。通常人们将这种成像叫做聚焦式成像(amplification multiple manufacturing)或称集中式成像(amplification mode manufacturing)。在显微镜中，聚焦式成像主要有两种：一种是通过透射光与光源相配而产生聚焦现象，另一种是通过散射光与光源相配而形成焦点。聚焦式成像原理非常简单，就是将目标物体从所对光照射区域中心移开，观察目标物体后观察物体即可实现对光观测；散射光能被物体吸收，在入射角较大时便能达到散射状态。根据散射原理的不同，显微镜采取了不同办法实现对光成像。
三、对光处理技术
目前，对光处理技术已发展成为对光显微中的主要手段之一。对光处理技术包括控制对光信号、测量图像数据、确定最佳图像分辨率、调节图像与光源之间的匹配等诸多方面。对光处理技术种类繁多，各种技术都有各自的优缺点，而主要的技术有以下几种：①用来消除光学显微成像系统中多余像素的技术；②用来补偿对光信号不能正常显示或亮度不足的技术；③用来调节图像亮度或者光比的技术；④用来消除图像畸变的技术；⑤用于改变光束的方向来改变图像亮度或光束对焦角度来调节对焦方式等。由于对光处理技术种类繁多并存在一定差别，因此不同技术之间不能互相替代甚至相互促进。目前对光显微镜应用较多而处理效果较好的是光栅技术和干涉技术。
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