显微镜，是一种用来观察物体的电子显微镜。电子显微镜是利用电子设备来获取物体的图像信息，再通过光学装置将其转换为计算机可识别的图像。在电子显微镜中，电子显微镜实际上是对光线进行测量与记录的设备。对于电子显微镜而言，光是其必不可少的光源之一，光在显微镜中通过光学显微镜对物体进行观察与记录。通过电子显微镜观察物体时，可以发现在这类电子显微镜下物体表面存在着反射光；在显微镜上观察物体时，可以观察到反射光；在成像仪器上拍摄物体时可对物进行对比；通过对光进行观测。
1、对镜中光斑的认识
一个光学显微镜设备中，除了有照度计外，还有一个放大镜。放大镜可以把一个物体（被观察物）进行放大，并通过在放大镜中观察物体（被观察物）与放大后的图像显示的大小程度来判断。如果放大倍数为5倍或者更高，则说明该物体被观察物与放大后照片之间存在一定的差距。对同一个光学放大镜而言，两张照片之间存在着一定比例的光斑。因此对电子显微显微镜而言，能够正确地判断出该物体中没有光斑存在是非常重要的。
2、镜面照明方法
在光学显微镜中，镜面照明法就是指利用镜面反射光。在使用镜面照明法时如果需要进行对物观测，就需要正确地设置光学窗口与对光窗口。由于光学窗口在镜面上呈球形，所以要避免光学窗口边缘产生较大的光反射。另外，还需要注意镜面窗口下方区域与上方区域中不能有过多的散射体；并且不能让光线进入散射体，否则很容易对视网膜造成伤害。
3、对光方法
对光的方法有很多，我们在日常生活中经常会看到不同的对光方式，比如：用点镜法、调焦旋转法、色散旋转法、分色镜法、光幕对正法、光幕对偏移法等。如果要将不同对光方法进行比较，我们可以通过观察物体来进行比较。例如：把样品放入显微镜中进行对光测量，观察样品表面时就可以看到不同方向上的光信号强度存在差异；用色散旋转法进行对光测量；通过不同对光法进行对比实验等。不同的对光法作用效果不同，我们可以根据实际需要进行选择及利用。同时我们在运用这种方式对光线进行测量时应该注意：尽量不要将光源直接照射在物体上或者物体表面；最好将光源距离较远的一面朝上放置；如果使用反光屏，则必须让镜子处于中间位置；在使用多点显微镜时最好设置成“双光路”模式（分别照射不同角度上的光线）进行对光观测；在使用多点显微镜时如果想要获取更多细节信息的话应尽量避免反光屏所出现的明暗变化。
4、物镜上的物位标志
物镜的光轴，也就是成像中心。这个位置是用来确定焦点的位置，通常也会用在显微镜的其他地方。有时，像线也会被放置在焦点附近。物镜光轴也与距离有关，物镜距离越近，成像中心就越小。
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